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Tipo: Trabalho de Conclusão de Curso
Título: Estudo de valores normais de leucocitos e de sub-populações de linfocitos T em indivíduos Moçambicanos adultos sem manifestações aparentes de doença
Autor(es): Balane, Cornelio P.
Primeiro Orientador: Cruz, Fernando de la
Resumo: 80 indivíduos adultos (>=15 anos), sem evidência de sintomas de doença, foram estudados com objectivos de determinar os valores de concentração de linfócitos totais, e sub-populações de linfócitos T, no sangue periférico de indivíduos normais e seus intervalos de referência. Do número estudado metade foi do sexo masculino (dadores de sangue, banco de sangue do H.C.M.) e a outra metade do sexo feminino (mulheres atendidas nas consultas de planeamento familiar nos centros de saúde da Polana e Alto-maé). Dos 7 ml de sangue venoso, colhidos de cada indivíduo incluído no estudo, foram feitas as seguintes análises: (1) determinação da concentração de leucócitos totais, por uma contagem na câmara de Neubauer, (2) fórmula leutocitária por uma contagem diferencial "coloração de Romanowsky", (3) separação de linfócitos, pelo método de centrifugação de gradiente de densidade em Histopaque “Sigma Chemicals” e (4) identificação e contagem de subpopulações de linfócitos T. utilizando a técnica APAAP “DANO Laboratories, USA" e visualizando num microscroscópio de luz convencional. A todas as amostras se fez previamente o rastreio de anticorpos anti-HIV utilizando um teste ELISA comercial descartando-se todos aquelas que revelaram ser positivas. Criando uma base de dados em microcomputador e com auxílio do programa Lotus 1- 2-3 e a sua folha de cálculo, determinaram-se os valores de concentração de leucócitos totais, linfócitos totais e subpopulações de linfócitos T, assim como a razão entre estas subpopulações estudadas. Agruparam-se os indivíduos por sexo compararam-se os mesmos para os valores médios de concentração das populações celulares aplicando-se-lhes o teste de t de student que revelou para p>0.05 diferença significativa de valores médios obtidos para cada grupo. Com o auxílio do programa MICROSTAT, as popularções celulares foram aferidas quanto á normalidade de distribuição dos seus valores utilizando o teste de chi- quadrado para a qualidade de ajuste a uma distribuição normal. Em consequência estimaram-se a média e respectivos desvios-padrão para estabelecimento dos limites dos intervalos de referência. 0 efeito da idade nos valores de concenteração das populações celulares estudadas, foi avaliado pelo teste t de student depois de agrupados os indivíduos, grupos de idade 15-24 anos : 25-34 anos e > 35 anos, analisando-os por sexo e por grupos etários em sexos diferentes. O sexo feminino apresentou uma diferença significativa entre os grupos etários 15- 24 e 25-34 anos para p<0.05 quanto aos valores médios de concentração de linfócitos TI 1 (CD11); linfócitos T4(CD4); linfócitos T8(CD8) e linfócitos totais atribuída a factores não controlados nos indivíduos estudados. Na comparação por grupos etários de sexos opostos só se encontrou diferenças significativas no grupo dos 15-24 anos. As variações nas contagens de linfócitos T4, T8 e Tll, foram controladas pela determinação da taxa de reproductibilidade, que para todos os fenótipos celulares a 90% e portanto por nós considerado admissível. Os valores obtídos neste estudo sendo baixos em relação a outros reportados por outros autores chama a atenção para a relevância deste estudo e está de acordo com as variações já descritas duma região geográfica para outra . Estudos na sua sequência poderão comprovar a aplicabilidade dos valores obtidos no diagnóstico clínico de certas imunodeficiência faclitando o refinar de limitações da tecnica para uso na condições do país.
Abstract: 80 adult individuals (>=15 years), with no evidence of disease symptoms, were studied with the aim of determining the concentration values ​​of total lymphocytes, and T lymphocyte subpopulations, in the peripheral blood of normal individuals and their reference ranges . Of the number studied, half were male (blood donors, H.C.M. blood bank) and the other half female (women attending family planning consultations at the health centers of Polana and Alto-maé). Of the 7 ml of venous blood, collected from each subject included in the study, the following analyzes were performed: (1) determination of total leukocyte concentration, by a count in the Neubauer chamber, (2) leukocyte formula by a differential count "staining de Romanowsky", (3) lymphocyte separation, by the density gradient centrifugation method in Histopaque "Sigma Chemicals" and (4) identification and counting of T lymphocyte subpopulations using the APAAP technique "DANO Laboratories, USA" and visualizing in a conventional light microscope. All samples were previously screened for anti-HIV antibodies using a commercial ELISA test, discarding all those that were found to be positive. Creating a microcomputer database and using the Lotus 1-2-3 program and its spreadsheet, the concentration values ​​of total leukocytes, total lymphocytes and T lymphocyte subpopulations were determined, as well as the ratio between these studied subpopulations. The individuals were grouped by sex and compared to the mean values ​​of concentration of cell populations, applying the Student t test, which revealed for p>0.05 a significant difference in the mean values ​​obtained for each group. With the help of the MICROSTAT program, cell populations were checked for normal distribution of their values ​​using the chi-square test for the quality of fit to a normal distribution. Consequently, the mean and respective standard deviations were estimated to establish the limits of the reference intervals. The effect of age on the concentration values ​​of the studied cell populations was evaluated by the Student t test after grouping the individuals, age groups 15-24 years: 25-34 years and > 35 years, analyzing them by sex and by age groups in different sexes. The female gender presented a significant difference between the 15-24 and 25-34 age groups for p<0.05 regarding the mean values ​​of the concentration of TI 1 lymphocytes (CD11); T4 lymphocytes (CD4); T8 lymphocytes (CD8) and total lymphocytes attributed to uncontrolled factors in the individuals studied. When comparing age groups of opposite sexes, significant differences were only found in the 15-24 age group. Variations in T4, T8 and Tll lymphocyte counts were controlled by determining the reproducibility rate, which for all cell phenotypes at 90% and therefore considered acceptable by us. The values ​​obtained in this study, being low in relation to others reported by other authors, draw attention to the relevance of this study and are in accordance with the variations already described from one geographic region to another. Subsequent studies may prove the applicability of the values ​​obtained in the clinical diagnosis of certain immunodeficiencies, facilitating the refinement of the limitations of the technique for use in the conditions of the country. (TRADUÇÃO NOSSA)
Palavras-chave: Doenças
Concentração de linfócitos
Rastreio de anticorpos
CNPq: Ciências Biológicas
Imunologia
Idioma: por
País: Moçambique
Editor: Universidade Eduardo Mondlane
Sigla da Instituição: UEM
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Ciências
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: http://monografias.uem.mz/handle/123456789/1245
Data do documento: 8-Dez-1990
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